Analiza advantamu w żywności za pomocą wysokowydajnej chromatografii ciekłej

Analiza Awantamu w Dodatkach do Żywności

Niniejszy eksperyment przeprowadzono w oparciu o "GB 1886.377-2024 Krajowy Standard Bezpieczeństwa Żywności - Dodatek do Żywności Awantam", wykorzystując system wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) serii LC3200 firmy Wayeal, wyposażony w detektor UV do analizy. Wyniki eksperymentu wykazały doskonałą przydatność systemu, z dobrze wykształconymi pikami zarówno dla kwasu benzoesowego, jak i awantamu. W pobliżu pików docelowych nie występują inne piki, a wysokie liczby teoretycznych półek potwierdziły zgodność ze wszystkimi wymaganiami testowymi. Współczynnik korelacji liniowej przekroczył 0,999. Eksperyment wykazał doskonałą powtarzalność, ze względnymi odchyleniami standardowymi (RSD) czasu retencji wynoszącymi 0,027% dla kwasu benzoesowego i 0,049% dla awantamu oraz RSD powierzchni piku wynoszącymi odpowiednio 0,184% i 0,133%. Teoretyczne limity detekcji wynoszą 0,066 mg/L dla kwasu benzoesowego i 0,113 mg/L dla awantamu. W badaniu próbek nie wykryto żadnych analitów docelowych. Wszystkie dane analityczne spełniły wymagania dotyczące wydajności instrumentalnej określone w metodologii farmakopealnej.

Słowa kluczowe: Awantam, wysokosprawna chromatografia cieczowa, detektor UV.

1. Metoda eksperymentu

1.1 Konfiguracja instrumentu

Tabela 1 Lista konfiguracji systemu HPLC

1.2 Materiały eksperymentalne i sprzęt pomocniczy

Acetonitryl: Klasa chromatograficzna

Standard kwasu benzoesowego

Standard awantamu

1.3 Warunki testowe

Tabela 2 Warunki analizy HPLC

1.4 Przygotowanie roztworu

1.4.1 Roztwór wzorca wewnętrznego

Dokładnie odważyć 40 mg kwasu benzoesowego, rozpuścić w mieszanym rozpuszczalniku woda-acetonitryl i precyzyjnie rozcieńczyć do 50 ml.

1.4.2 Roztwór standardowy

Dokładnie odważyć 40 mg awantamu, rozpuścić w mieszanym rozpuszczalniku woda-acetonitryl i precyzyjnie rozcieńczyć do 50 ml, aby przygotować roztwór podstawowy o stężeniu 0,8 mg/ml. Precyzyjnie pobrać 8 ml, 9 ml, 10 ml, 11 ml i 12 ml roztworu podstawowego do pięciu oddzielnych kolb miarowych. Dodać 5 ml roztworu wzorca wewnętrznego do każdej kolby, a następnie rozcieńczyć do 50 ml mieszanym rozpuszczalnikiem woda-acetonitryl, aby przygotować roztwory robocze standardowe o stężeniach 0,128 mg/ml, 0,144 mg/ml, 0,160 mg/ml, 0,176 mg/ml i 0,192 mg/ml do budowy krzywej kalibracyjnej.

1.4.3 Przygotowanie próbki

Dokładnie odważyć 40 mg badanej próbki, rozpuścić w mieszanym rozpuszczalniku woda-acetonitryl i precyzyjnie rozcieńczyć do 50 ml. Pobrać 10 ml przygotowanego roztworu do kolby miarowej, dodać 5 ml roztworu wzorca wewnętrznego i rozcieńczyć do 50 ml mieszanym rozpuszczalnikiem woda-acetonitryl. Przefiltrować roztwór przez filtr membranowy do testowania.

2. Wyniki i dyskusja

2.1 Przydatność systemu

Rysunek 1 Chromatogram testu przydatności systemu

Tabela 3 Dane testu przydatności systemu

Uwaga: Jak pokazano w powyższej tabeli, test przydatności systemu wykazał doskonałe kształty pików zarówno dla kwasu benzoesowego, jak i awantamu, ze współczynnikami ogona poniżej 1,2. Rozdzielczość przekroczyła 1,5, a wysokie liczby teoretycznych półek w pełni spełniły wymagania metody analitycznej.

2.2 Test krzywej kalibracyjnej

Rys. 2 Raport z testu krzywej kalibracyjnej awantamu

Uwaga: Wyniki eksperymentu wykazały doskonałą liniowość dla ilościowego oznaczania awantamu, ze współczynnikiem korelacji (R²) przekraczającym 0,999, co spełnia wymagania eksperymentu.

2.3 Test powtarzalności

Rys. 3 Chromatogram testu powtarzalności sześciu wstrzyknięć

Tabela 4 Dane testu powtarzalności kwasu benzoesowego (6 wstrzyknięć)

Tabela 5 Dane testu powtarzalności awantamu (6 wstrzyknięć)

Uwaga: Z danych w powyższej tabeli wynika, że powtarzalność czasu retencji kwasu benzoesowego i awantamu wynosi odpowiednio 0,027% i 0,049%, a powtarzalność powierzchni piku wynosi odpowiednio 0,184% i 0,133%, co wskazuje na dobrą powtarzalność.

2.4 Test limitu detekcji

Rys. 4 Chromatogram roztworu standardowego kwasu benzoesowego 0,8 mg/L i awantamu 1,28 mg/L

Tabela 6 Wyniki testu dla roztworu standardowego kwasu benzoesowego 0,8 mg/L i awantamu 1,28 mg/L zawierającego

Uwaga: Zgodnie z danymi testowymi próbki standardowej w powyższej tabeli, przy stężeniu kwasu benzoesowego 0,8 mg/L i stężeniu awantamu 1,28 mg/L, teoretyczne limity detekcji dla kwasu benzoesowego i awantamu, obliczone na podstawie 3-krotnego stosunku sygnału do szumu, wynoszą odpowiednio 0,066 mg/L i 0,113 mg/L.

2.5 Test napoju marki A

Rys. 5 Chromatogram napoju marki A

Uwaga: W testowanym napoju markowym nie wykryto awantamu.

3. Wniosek

Niniejszy eksperyment przeprowadzono zgodnie z „GB 1886.377-2024 Krajowy Standard Bezpieczeństwa Żywności - Dodatek do Żywności Awantam” przy użyciu systemu wysokosprawnej chromatografii cieczowej Wayeal LC3200, wyposażonego w detektor UV do analizy. Wyniki eksperymentu wykazały doskonałą przydatność systemu, z dobrze wykształconymi pikami zarówno dla kwasu benzoesowego, jak i awantamu. W pobliżu pików docelowych nie występują inne piki, a wysokie liczby teoretycznych półek potwierdziły zgodność ze wszystkimi wymaganiami testowymi. Współczynnik korelacji liniowej przekroczył 0,999. Eksperyment wykazał doskonałą powtarzalność, ze względnymi odchyleniami standardowymi (RSD) czasu retencji wynoszącymi 0,027% dla kwasu benzoesowego i 0,049% dla awantamu oraz RSD powierzchni piku wynoszącymi odpowiednio 0,184% i 0,133%. Teoretyczne limity detekcji wynoszą 0,066 mg/L dla kwasu benzoesowego i 0,113 mg/L dla awantamu. W badaniu próbek nie wykryto żadnych analitów docelowych. Wszystkie dane analityczne spełniły wymagania dotyczące wydajności instrumentalnej określone w metodologii farmakopealnej.