Określenie zanieczyszczeń nitrosamin w tabletkach z hydrochlorkiem propranololu za pomocą chromatografii ciekłej

Słowa kluczowe: propranolol, wysokowydajna chromatografia ciekła, zanieczyszczenia nitrozaminowe

1Instrumenty i odczynniki

1.1 Wykaz konfiguracji systemu HPLC

1.2 Odczynniki i roztwory standardowe

Tabela 2 Odczynniki i rozwiązania standardowe

1.3 Materiały eksperymentalne i sprzęt pomocniczy

Czyszczyciel ultradźwiękowy

Mieszanka wirusowa

2Metoda eksperymentalna

2.1 Przygotowanie roztworu

2.1.1 2 mol/l roztwór wodorotlenku sodu: Weź 4 g wodorotlenku sodu, rozpuść w 50 ml wody i dobrze wymieszaj.

2.1.2 kwas acetonitrylowo-wodno-siarkowy (55:45:0.1) Mieszanka: Weź 1,6 g siarczanu sodu dodecylu i 0,31 g fosforanu diwodorowodu tetrabutylamonu, dodaj 1 ml kwasu siarkowego, 450 ml wody i 550 ml acetonitrylu.3 z roztworem wodorotlenku sodu 2 mol/l, i dobrze mieszać.

2.1.3 Rozpuszczalnik: taki sam jak faza ruchoma.

2.1.4 Roztwór liniowy: dokładnie waż odpowiednią ilość standardowego N-nitroso-propranololu,rozpuścić i rozcieńczyć fazą ruchomą w celu uzyskania roztworu zawierającego około 200 ng na 1 ml jako standardowy roztwór podstawowyNastępnie należy dokładnie przenieść odpowiednie ilości roztworu podstawowego do sześciu kolb objętościowych o pojemności 100 ml, rozcieńczonych do oznaczenia fazą ruchomą,i dobrze zmieszać, aby przygotować standardowy szereg krzywych roboczych o stężeniu 00,8ng/mL, 1ng/mL, 2ng/mL, 3ng/mL, 4ng/mL i 6ng/mL.

2.1.5 Standardowe roztwór referencyjny: dokładnie waż odpowiednią ilość standardowego standardu referencyjnego N-nitroso-propranololu,rozpuścić i rozcieńczyć fazą ruchomą w celu przygotowania roztworu zawierającego około 2 ng N-nitroso-propranololu na 1 ml jako standardowy roztwór referencyjny.

2.2 Przygotowanie próbek

2.2.1 Próbka roztworu: dokładnie waż odpowiednią ilość tabletek hydrochlorku propranololu w proszku, rozpuszczaj i rozcieńcz z fazą ruchomą w celu przygotowania roztworu zawierającego około 0.27 mg propranololu na 1 ml w roztworze próbkowym.

2.2.2 Dokładność Roztwór: dokładnie waż około 297 mg tabletek hydrochlorku propranololu w formie cienkiego proszku do kolby objętościowej o pojemności 100 ml.Dodać odpowiednią ilość standardowego roztworu referencyjnego N-nitroso-propranololu, rozpuszcza się i rozcieńcza do oznaczenia fazą ruchomą w celu przygotowania 100% próbki z dodatkiem. Dobrze miesza się, aby uzyskać roztwór precyzyjny.

3Wynik eksperymentu.

3.1 Specyfika

Rys. 2 Chromatogram specyficzności

Uwaga: rozpuszczalnik nie wpływa na wykrycie N-nitroso-propranololu,a chromatograficzne szczyty innych zanieczyszczeń w roztworze badanym również nie wpływają na określenie zanieczyszczenia N-nitroso-propranololu.

3.2 Badanie liniowe

Rys. 3 Standardowa krzywa zanieczyszczeń N-nitroso-propranololu

Uwaga: Z wyników eksperymentalnych wynika, że współczynnik korelacji (R) krzywej badania zanieczyszczeń N-nitroso-propranololu przekracza 0.999, spełniające wymagania badania.

3.3 Badanie powtarzalności

Rys. 4 Chromatogramy sześciu powtarzających się wstrzyknięć dla 2 ng/ml standardowych

Tabela 3 Dane z sześciu powtórzonych wstrzyknięć dla 2 ng/ml standardowych

Uwaga: Jak pokazano w tabeli powyżej, powtarzalność czasu retencji N- nitrozo- propranololu wynosi 0,043%, a powtarzalność szczytowa wynosi 0, 464%, co wskazuje na dobrą powtarzalność.

3.4 Badanie dokładności

Rys. 5 Chromatogramy dokładności N-nitrozo-propranololu w tabletkach

Tabela 4 Dokładność stosowania propranololu w tabletkach z hydrochlorkiem (N- nitroso- propranololu)

Uwaga: Odzysk N-nitroso-propranololu w sześciu próbkach wahał się od 96,98% do 104,71%, przy średniej odzyskaniu 101,38%.

3.5 Badanie LOD

Rys. 6 Chromatogram badawczy N-nitroso-propranololu w stężeniu standardowym 2 ng/ml

Tabela 5 Dane badania referencyjnego N-nitroso-propranololu w stężeniu standardowym 2 ng/ml

Uwaga: W oparciu o dane z badań w odniesieniu do normy referencyjnej N-nitroso-propranololu w stężeniu 2 ng/ml w tabeli powyżej,teoretyczny limit wykrywalności N-nitroso-propranololu oblicza się jako 0.151ng/mL przy użyciu stosunku sygnału do hałasu 3:1 jako kryterium granicznego wykrywania.

3.6 Badanie tabletki marki

Rys. 7 Chromatogram testowy tabletek marki

Uwaga: N- Nitroso- propranolol nie został wykryty w tabletkach marki.

4Wniosek

A study on the nitrosamine impurity N-nitroso-propranolol in propranolol hydrochloride tablets was conducted in accordance with the FDA's recently published guidance document on establishing acceptable intake levels for Nitrosamine Drug Substance-Related Impurities (NDSRI)Zgodnie z niniejszym dokumentem wartość dopuszczalnego spożycia (AI) obliczona jest na 1500 ng/ dobę..5 ppm. Walidacja metody została przeprowadzona przy użyciu serii wysokowydajnej chromatografii ciekłej (HPLC) firmy Wayeal® wyposażonej w detektor UV.Próbki tabletek analizowano przy użyciu zwalidowanej metody wykrywania.Wszystkie powyższe dane są zgodne z wymogami farmakopei dotyczącymi przyrządów.