Oznaczanie szczawianu we wstrzyknięciu glukonianu wapnia przy użyciu kolumny do chromatografii jonowej NovaChrom

Glukonian wapnia to organiczna sól wapnia szeroko stosowana w produktach spożywczych i farmaceutycznych, głównie w celu suplementacji wapnia i leczenia niedoboru wapnia. Podczas procesów utleniania, fermentacji i degradacji glukoza może wytwarzać niewielką ilość kwasu szczawiowego jako produktu ubocznego. Połączenie kwasu szczawiowego z wapniem bezpośrednio zmniejsza biodostępność suplementów wapnia, co prowadzi do zmniejszenia skuteczności suplementacji wapnia. Nadmiar kwasu szczawiowego może wywołać hipokalcemię, prowadzącą do zaburzeń pobudliwości nerwowo-mięśniowej i zaburzeń rytmu serca. Zagrożenia te są szczególnie krytyczne w przypadku pacjentów otrzymujących leki podawane dożylnie i dlatego wymagają rygorystycznych środków zapobiegania i kontroli. W związku z tym zawartość kwasu szczawiowego w glukonianie wapnia służy jako jeden z ważnych wskaźników jakości służących do oceny jakości produktu. W zmienionym projekcie standarduFarmakopea chińska(wydanie 2025) przez Komisję Farmakopei Chińskiej oznaczenie szczawianu zostało dodane do projektu normy dla glukonianu wapnia.

W tym badaniu kolumna do chromatografii anionowej na bazie węglanu NovaChrom (CS-5A-P4, 4.0×250 mm) zastosowano do oznaczania szczawianu we wstrzyknięciu glukonianu wapnia. Procedura badania jest prosta, a wyniki są stabilne i w pełni spełniają wymagania analityczne. Stanowi to wiarygodne odniesienie do oznaczania szczawianu we wstrzyknięciu glukonianu wapnia za pomocą chromatografii jonowej.

Słowa kluczowe:kolumna do chromatografii jonowej;Farmakopea chińska; glukoza; kolumna do chromatografii anionowej; zastrzyk glukonianu wapnia; kwas szczawiowy.

1. Eksperymentuj

1.1 Urządzenie główne i odczynniki

Chromatograf jonowy: Chromatograf jonowy Wayeala wyposażony w detektor przewodności.

Kolumna do chromatografii anionowej: CS-5A-P4, 4.0×250 mm

Kolumna chroniąca anion: HS-5AG, 4×30 mm

Szczawian sodu: klasa elektroniczna

Marka handlowa zastrzyków glukonianu wapnia

Jednorazowa strzykawka (2ml)

Wodny filtr strzykawkowy (0,45μM)

Przydatność systemu: Teoretyczna liczba płytek obliczona na podstawie piku szczawianu nie może być mniejsza niż 2500, a współczynnik ogonowania nie może być większy niż 1,2.

1.2 Wstępna obróbka próbki

1.2.1 Rozwiązanie referencyjne

Odmierzyć odpowiednią ilość szczawianu sodu, dokładnie odważyć, rozpuścić i rozcieńczyć ilościowo roztworem kwasu solnego (1→1200) w celu wytworzenia roztworu zawierającego około 1,5μg szczawianu sodu na 1 ml (co odpowiada około 1μg szczawianu na 1 ml).

1.2.2 Rozwiązanie testowe

Pobrać odpowiednią ilość tego produktu, dokładnie odważyć, rozpuścić i rozcieńczyć ilościowo roztworem kwasu solnego (1→1200) w celu wytworzenia roztworu zawierającego około 20 mg na 1 ml.

1.3 Warunki pracy przyrządu

Temperatura kolumny chromatograficznej: 30°C

Temperatura ogniwa przewodnościowego: 35°C

Eluent: 5,0 mM węglan sodu + 1,0 mM wodorowęglan sodu

Natężenie przepływu: 1,0 ml/min

Objętość wtrysku: 50μL

2. Wyniki i dyskusja

2.1 Test rozwiązania referencyjnego

Roztwór referencyjny po wstępnej obróbce zgodnie z metodą przygotowania próbki opisaną w sekcji 1.2 wstrzyknięto do układu i poddano analizie w warunkach instrumentalnych określonych w sekcji 1.3. Chromatogram testowy przedstawiono na ryc. 1, a wyniki testu przedstawiono w tabeli 1 poniżej.

Ryc. 1 Chromatogram roztworu referencyjnego

Tabela 1 Wyniki testu roztworu referencyjnego

Uwaga: Teoretyczna liczba płytek obliczona na podstawie piku szczawianu wyniosła 9842, a współczynnik ogonowania wyniósł 1,163.

2.2 Test roztworu próbki

Roztwór próbki po wstępnej obróbce zgodnie z metodą przygotowania próbki opisaną w sekcji 1.2 wstrzyknięto do układu i poddano analizie w warunkach instrumentalnych określonych w sekcji 1.3. Chromatogram badania przedstawiono na rys. 2, a wyniki badania przedstawiono w tabeli 2.

Ryc. 2 Chromatogram roztworu próbki

Tabela 2 Wyniki testu próbki roztworu

Uwaga: Teoretyczna liczba płytek obliczona na podstawie piku szczawianu wyniosła 8827, a współczynnik ogonowania wyniósł 1,119.

2.3 Test powtarzalności

Ryc. 3 Chromatogramy roztworu referencyjnego dla 6 kolejnych wstrzyknięć

Ryc. 4 Chromatogramy roztworu próbki dla 6 kolejnych wstrzyknięć

Tabela 3 Dane testowe

Uwaga: Wartości RSD czasu retencji zarówno dla roztworu próbki, jak i roztworu odniesienia mieściły się w zakresie od 0,027% do 0,113%, a wartości RSD powierzchni piku mieściły się w zakresie od 0,426% do 0,505%.

3. Wniosek

Kolumna do chromatografii anionowej na bazie węglanu NovaChrom (CS-5A-P4, 4.0×250 mm) w połączeniu z chromatografem jonowym Wayeal został z powodzeniem zastosowany do oznaczania szczawianów we wstrzyknięciu glukonianu wapnia. Metoda wykazała dużą dokładność, dobrą rozdzielczość, stabilną powtarzalność i wysoką czułość. Wszystkie wyniki spełniły kryteria przydatności systemu określone w pktFarmakopea chińska, z teoretyczną liczbą płytek przekraczającą 2500 i współczynnikami ogonowania poniżej 1,2 dla piku szczawianowego.