Określenie pozostałości antybiotyków chinolonów w mięsie kurczaka za pomocą systemu spektrometrii masowej ciekłej chromatografii (LC-MS/MS) Wayeal® LCMS-TQ9200
China's National Food Safety Standard "GB 31650-2019 Maximum Residue Limits for Veterinary Drugs in Foods" specifies the maximum residue limits (MRLs) of certain quinolone antibiotics in animal-derived food productsDodatkowo, "GB 31658.17-2021 Narodowy Standard Bezpieczeństwa Żywności - Określenie tetracyklin, Sulfonamides and Quinolones Residues in Foods of Animal Origin by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry" specifies the LC-MS/MS analytical method and corresponding limits of quantification (LOQs) for 13 quinolone antibiotics. This application note presents the successfully validated results for the analysis of 13 quinolone antibiotic residues in chicken meat using Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system.
Kluczowe słowa:LC-MS/MS, chinolony, pozostałości leków weterynaryjnych, bezpieczeństwo żywności.
Wayeal LCMS-TQ9200 System spektrometrii masy płynnej chromatografii tandemowej
Metoda chromatografii ciekłej
Kolumna chromatograficzna: C18 3,0x100 mm
Faza ruchoma: A: 0,1% metanolu kwasu mrówkowego, B: 0,1% roztwór kwasu mrówkowego
Przepływ: 0,4 ml/min
Temperatura kolumny: 45°C
Objętość wstrzyknięcia: 3 μl
Metoda spektrometrii masowej
Tabela 1 Parametry źródła jonowego spektrometrii masowej
| Źródło jonowe |
ESI, tryb pozytywnych jonów |
| Napięcie źródła jonowego |
5500V |
| Prędkość przepływu gazu rozpuszczalnego |
18000 mL/min |
| Prędkość przepływu gazu z nebulizatora |
2000 mL/min |
| Przepływ gazu zasłonowego |
5000 ml/min |
| Przepływ gazu zderzającego |
800 μl/min |
| Temperatura rozpuszczania |
450°C |
| Temperatura gazu zasłony |
150°C |
Tabela 2 Parametry spektrometrii masowej dla każdego związku
| Związki |
Q1 |
Q3 |
Potencjał deklaserowania (V) |
Energia zderzenia (V) |
| Kwas oksolinowy |
262.1 |
244* |
100 |
25 |
| 160 |
100 |
50 |
| Flumequine |
262.1 |
202 |
115 |
44 |
| 244.1* |
115 |
24 |
| Norfloksacyna |
320.1 |
302.1* |
90 |
27 |
| 233.2 |
90 |
33 |
| Enoksacyna |
321.2 |
234 |
100 |
38 |
| 303* |
100 |
30 |
| Ciprofloksacyna |
332.2 |
231 |
100 |
49 |
| 288 |
100 |
25 |
| Pefloksacyna |
334.1 |
316* |
110 |
29 |
| 233.2 |
110 |
35 |
| Lomefloksacyna |
352.1 |
265.1* |
110 |
31 |
| 334 |
110 |
29 |
| Danofloksacyna |
358.1 |
340.1* |
100 |
32 |
| 283.1 |
100 |
32 |
| Enrofloksacyna |
360.2 |
316.1 |
110 |
27 |
| 245.1* |
110 |
38 |
| Ofloksacyna |
362.1 |
318.3 |
75 |
25 |
| 261.2* |
75 |
34 |
| Marbofloksacyna |
363.2 |
72.1* |
100 |
25 |
| 345.2 |
100 |
29 |
| Sarafloksacyna |
386.1 |
299.1* |
110 |
38 |
| 342 |
110 |
27 |
| Difloksacyna |
400.2 |
299.1 |
110 |
38 |
| 382.2 |
120 |
30 |
Uwaga: jon oznaczony * jest ilościowym jonem
1Wynik eksperymentu.
1.1 Kształt szczytu
Określenie 13 antybiotyków chinolonów zostało zakończone w ciągu 11 minut.Wszystkie związki wykazały silną odpowiedź sygnałową, spełniając wymagania kwantifikacji eksperymentalnej.
Rys. 1 Chromatogram 13 antybiotyków chinolońskich
1.2- Poziom linii.
W celu przygotowania standardów kalibracyjnych, obejmujących stężenia od 2 do 500 ng/mL, rozcieńczono odpowiednią ilość standardowego roztworu mieszanego z chinolonem.Ocena linearności wykazała doskonałą zgodność z nominalnymi stężeniamiWspółczynnik określenia (R2) wahał się od 0,9921 do 0.9998, potwierdzając zadowalającą liniowość wszystkich składników.
Tabela 3 Tabela zakresu liniowego
| Związki |
Zakres liniowy |
Współczynnik korelacji liniowej R2 |
| Kwas oksolinowy |
2-500 ng/mL |
0.9989 |
| Flumequine |
2-500 ng/mL |
0.9988 |
| Norfloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9968 |
| Enoksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9989 |
| Ciprofloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9982 |
| Pefloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9992 |
| Lomefloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9921 |
| Danofloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9969 |
| Enrofloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9998 |
| Ofloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9941 |
| Marbofloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9997 |
| Sarafloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9946 |
| Difloksacyna |
2-500 ng/mL |
0.9973 |
Rys. 2 Wyniki w zakresie liniowym dla wybranych antybiotyków chinolońskich
1.3Limit wykrywania (LOD) i limit ilościowania (LOQ)
W krajowej normie bezpieczeństwa żywności GB 31658.17-2021 określono limit wykrywania (MDL) 2μg/kg i limit ilościowy (MQL) 10μg/kg. W tej metodziewszystkie związki docelowe wykazały stosunek sygnału do hałasu znacznie większy niż 3 przy 2μg/kg i 10 przy 10μg/kg, w pełni zgodne z wymogami wrażliwości określonymi w normie krajowej.
Tabela 4 Wskaźniki sygnału do hałasu dla granic wykrywania i ilościowania związków docelowych
| Związek |
SNR (S/N) |
| 2 μg/kg |
10 μg/kg |
| Kwas oksolinowy |
111.26 |
359.11 |
| Flumequine |
59.64 |
244.73 |
| Norfloksacyna |
70.16 |
392.57 |
| Enoksacyna |
23.74 |
80.26 |
| Ciprofloksacyna |
37.91 |
99.26 |
| Pefloksacyna |
28.70 |
125.81 |
| Lomefloksacyna |
48.54 |
165.84 |
| Danofloksacyna |
105.74 |
348.10 |
| Enrofloksacyna |
35.97 |
120.82 |
| Ofloksacyna |
51.67 |
287.26 |
| Marbofloksacyna |
190.11 |
399.38 |
| Sarafloksacyna |
38.11 |
160.79 |
| Difloksacyna |
25.85 |
149.29 |
Rys. 3 Chromatogramy LOD/LOQ dla wybranych chinolonów
1.4. Badania precyzyjne
Wstrzykiwał się mieszany standardowy roztwór antybiotyków chinolońskich w trzech stężeniach (10, 50 i 100 ng/ ml) przez 6 razy w celu porównania czasu retencji i zmienności obszaru szczytowego.Jak pokazano w tabeli poniżej, wszystkie badane związki chinolonów wykazały odchylenia czasu retencji mniejsze niż 0, 3% i odchylenia powierzchni szczytowej mniejsze niż 5%,w pełni zgodne z wymogiem krajowej normy RSD ≤ 15% dla dokładności.
Tabela 5 Badanie precyzyjności różnych związków
Rys. 4 Precyzyjne chromatogramy wybranych związków
2Wniosek
Metoda ta wykorzystywała układ spektrometrii masowej płynnej chromatografii tandemowej Wayeal LCMS TQ9200 do określania antybiotyków chinolońskich w próbkach kurcząt.Dane eksperymentalne wykazały doskonałą wydajność chromatograficzną z dobrze zdefiniowanymi kształtami szczytowymi i brakiem ogona dla wszystkich analitów.Metody wykazały dobrą liniowość z współczynnikami korelacji (R2) przekraczającymi 0,99 dla wszystkich krzywych kalibracyjnych,wraz z doskonałą odtwarzalnością, co wynika z odchylenia czasu retencji poniżej 0Analiza trzech niezależnie przygotowanych partii próbek z kurczaka nie wykazała wykrywalnych pozostałości antybiotyków chinolonów. These results confirm that the analytical method coupled with the Wayeal LC-MS/MS system is fully capable of meeting routine qualitative and quantitative detection requirements for the target analytes in test samples.
Twoja wiadomość musi mieć od 20 do 3000 znaków!
