Oznaczanie Siedmiu Parabenów w Żywności Metodą Chromatografii Cieczowej

Parabeny (p-hydroksybenzoesany), jako klasa wysoce skutecznych i szerokospektralnych konserwantów, są szeroko stosowane w przemyśle spożywczym (takim jak sos sojowy, ocet, napoje, dżemy itp.), kosmetycznym i farmaceutycznym. Ich działanie antybakteryjne i bezpieczeństwo bezpośrednio wpływają na stabilność produktu i zdrowie konsumentów. Niniejszy eksperyment odnosi się do "GB 5009.31-2025 Krajowego Standardu Bezpieczeństwa Żywności — Oznaczanie parabenów w żywności", wykorzystując system wysokosprawnej chromatografii cieczowej serii Wayeal LC3500, wyposażony w detektor DAD do analizy.

Słowa kluczowe: dodatki do żywności; parabeny; p-hydroksybenzoesany; wysokosprawna chromatografia cieczowa.

1. Instrumenty i odczynniki

1.1 Lista konfiguracji wysokosprawnej chromatografii cieczowej

Tabela 1 Lista konfiguracji instrumentów

1

1.2 Odczynniki i standardy

Stopień analityczny

1.3 Materiał eksperymentalny i sprzęt pomocniczy

Waga analityczna

Myjka ultradźwiękowa

Mieszadło wirowe

2. Metoda eksperymentu

2.1 Przygotowanie odczynników

2.1.1 Mieszany roztwór roboczy standardu związków parabenów: Odpowiednio pobrać mieszany standard związków parabenów i rozcieńczyć go 30% metanolem-wodą, aby przygotować mieszane roztwory robocze standardu o stężeniach masowych 0,2 mg/L, 0,5 mg/L, 1,0 mg/L, 2,0 mg/L, 5,0 mg/L, 10 mg/L, 20 mg/L i 50 mg/L.

2.1.2 Wstępne przygotowanie próbek:

Odważyć 5 g (z dokładnością do 0,01 g) próbki do 50 ml wyskalowanej probówki wirówkowej (napoje gazowane wymagają odgazowania ultradźwiękami w myjce ultradźwiękowej przez 10 minut przed ważeniem). Dodać 30 ml roztworu metanol-woda (3+7), wymieszać w wirówce przez 3 minuty i poddać działaniu ultradźwięków przez 20 minut. Następnie dodać roztwór metanol-woda (3+7), aby doprowadzić całkowitą objętość do 40 ml. Odwirować przy 6000 obr./min przez 3 minuty, przefiltrować supernatant i pobrać przesącz do oczyszczania. Aktywować kolumnę ekstrakcji fazy stałej (SPE) sekwencyjnie 5 ml metanolu i 5 ml wody. Przenieść roztwór do oczyszczenia do aktywowanej kolumny SPE. Przepłukać kolumnę sekwencyjnie 5 ml wody i 5 ml roztworu metanol-woda (3+7), a następnie eluować 6 ml metanolu. Zebrać eluat, rozcieńczyć do 10 ml wodą, przefiltrować przez membranę i wstrzyknąć do wysokosprawnego chromatografu cieczowego w celu analizy.

3. Wynik eksperymentu

3.1 Testowanie przydatności systemu

Rys. 1 Chromatogram roztworu roboczego standardu dla związków parabenów

n.d.

Test przydatności systemu pokazuje, że każdy pik chromatograficzny wykazuje dobry kształt, wysoką liczbę teoretycznych półek, brak interferencji z otaczającymi pikami zanieczyszczeń, a wartości rozdzielczości są wszystkie większe niż 1,5, spełniając wymagania eksperymentalne.

3.2 Test powtarzalności

Rys. 2 Chromatogram testu powtarzalności 1,0 mg/L związku parabenowego (6 wstrzyknięć)

0.901

Test powtarzalności wykazał, że po sześciu kolejnych wstrzyknięciach roztworu roboczego standardu związku parabenowego o stężeniu 1,0 mg/L, powtarzalność czasu retencji była poniżej 0,2%, a powtarzalność pola piku poniżej 1,0%, co wskazuje na dobrą powtarzalność.

3.3 Test liniowości

Rys. 3 Chromatogram testu krzywej standardowej

Test liniowości pokazuje, że w zakresie 0,2–50 mg/L, mieszane krzywe standardowe dla siedmiu związków parabenowych wykazują współczynniki korelacji liniowej większe niż 0,9999, co wskazuje na doskonałą liniowość.

3.4 Test dokładności

Rys. 4 Chromatogram testu dokładności

104.8

Test dokładności wykazał, że odzyski siedmiu związków parabenowych w dodanych próbkach mieściły się w zakresie od 97,6% do 104,8%, co wskazuje na dobrą dokładność.

3.5 Test napoju marki A

Rys. 5 Chromatogram testu napoju marki A

Test próbek wykazał, że siedem związków parabenowych nie zostało wykrytych w napoju pewnej marki.

4. Wniosek