2024-10-22
Określenie 6-metylkumaryny w kosmetykach za pomocą chromatografii ciekłej
1.1 Konfiguracja przyrządów
Tabela 1 Wykaz konfiguracji chromatografii ciekłej
Nie, nie, nie. | Moduł | Kty |
1 | PB3210 Pompy binarne | 1 |
2 | CT3400 Piekarnik kolumnistyczny | 1 |
3 | AS3210 Autosampler | 1 |
4 | Detektor UV3210 | 1 |
5 | NovaChrom SC18 4,6*250 mm, 5 μm | 1 |
6 | Stacja robocza SmartLab | 1 |
1.2 Metoda eksperymentalna
1.2.1 Odczynniki
Tabela 2 Wykaz czynników
Nie, nie, nie. | Odczynniki | Czystość |
1 | Metanol | Wartość chromatograficzna |
2 | 6-metylokumaryna | 99% |
3 | Fosforan diwodoru amonu | AR |
4 | Kwas fosforanowy | GR |
1.2.1.1 Standardowy roztwór 6-metylokumaryny (1000 mg/l): Pobierz odpowiednią ilość 6-metylokumaryny standardowej,rozpuszczone i ustawione objętością metanolu i przygotowane do stężenia 1000 mg/l standardowego roztworu podstawowego.
1.2.1.2 Standardowy roztwór roboczy 6-metylkumaryny:Pipetowanie odpowiedniej ilości standardowego roztworu 6-metylkumaryny i rozcieńczenie metanolu w celu przygotowania serii krzywych roboczych o stężeniu 00,1 mg/l, 0,5 mg/l, 1,0 mg/l, 3,0 mg/l, 5,0 mg/l i 10,0 mg/l odpowiednio.
1.2.1.3 roztwór buforowy fosforanu diwodoru sodu: Weź 3,12 g fosforanu diwodoru sodu, dodaj wodę do rozpuszczenia i rozcieńcz do 1000 ml, a pH kwasu fosforanowego dostosuj do 3.5.
1.2.2 Warunki chromatografii
Tabela 3 Warunki chromatografii
Kolumna chromatograficzna | NovaChrom SC18 4,6*250mm 5μm | ||
Faza mobilna | A: metanol,B: roztwór buforowy diwodoru fosforanu sodu | ||
Wskaźnik przepływu | 1 ml/min | ||
Temperatura kolumny | 35°C | Długość fali | 275 nm |
Pojemność wstrzyknięcia | 10 μl |
Tabela 4 Program wytwarzania gradientów
Czas (min) | Faza mobilna A | Mobilna faza B |
0 | 55 | 45 |
11 | 55 | 45 |
12 | 90 | 10 |
40 | 90 | 10 |
41 | 55 | 45 |
50 | 55 | 45 |
1.2.3 Wstępna obróbka próby
Pobierz 1 g (z dokładnością do 0,001 g) próbki w kolbie objętościowej o pojemności 10 ml, dodaj 5 ml metanolu, wiruj i wstrząsnij, aby całkowicie zmieszać próbkę z roztworem ekstrakcyjnym, ekstrakcja ultradźwiękowa przez 20 min,ochłodzone do temperatury pokojowej, a następnie ustawione do 10 ml metanolu, zmieszane, a następnie przenoszone do rur odśrodkowych, odśrodkowane w temperaturze 5000 r/min przez 5 min,i nadmiernego filtrowanego przez 0.45 μm membrany organicznej, a następnie badane.
2Wynik eksperymentu.
2.1 Przydatność systemu
Rys. 1 Chromatogram norm 10 mg/l
Tabela 5 Dane z badań standardowych 10 mg/l
Związki | Czas przechowywania | Obszar szczytu | Teoretyczny numer tablicy |
6-metylokumaryna | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Uwaga:Chromatogram i dane pokazują, że 6-metylokumaryna ma dobry kształt szczytu, a wokół szczytu docelowego nie ma innych szczytów, a teoretyczna liczba płytek jest wysoka,spełniające wymagania eksperymentalne.
2.2 Standardowa krzywa
Rys. 2 Wynik badania krzywej standardowej
Uwaga: Chromatogram pokazuje, że wartość R współczynnika korelacji krzywej 6-metylkumaryny jest wyższa niż 0.9999, który spełnia wymagania eksperymentalne.
2.3 Powtarzalność
Rys. 3 Chromatogram powtarzalności 3 mg/ l Standardy 6 wstrzyknięć
Tabela 6 Dane dotyczące powtarzalności 3 mg/ l Standardy 6 wstrzyknięćTabela 6 Dane dotyczące powtarzalności 3 mg/ l Standardy 6 wstrzyknięćs
6-metylokumaryna |
Nie, nie, nie. | Czas przechowywania | Obszar szczytu |
1 | 11.159 | 177.710 | |
2 | 11.161 | 176.711 | |
3 | 11.142 | 177.128 | |
4 | 11.152 | 176.985 | |
5 | 11.150 | 177.469 | |
6 | 11.149 | 177.629 | |
RSD ((%) | 0.061 | 0.222 |
Uwaga: Zgodnie z danymi zawartymi w powyższej tabeli RSD powtarzalności czasu retencji 6-metylkumaryny wynosi 0,061%, a RSD powtarzalności obszaru szczytowego 0,222%.Powtarzalność jest dobra i spełnia wymagania eksperymentalne.
2.4 Limit wykrywania
Rys. 4 Chromatogram badawczy standardowy 0,02 mg/l
Tabela 7 Dane z badań standardowych 0,02 mg/l
Związki | Czas przechowywania | Obszar szczytu | SNR |
6-metylokumaryna | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Uwaga: Zgodnie z powyższymi danymi jako limit wykrywania oblicza się 3-krotny stosunek sygnału do hałasu, a stwierdzono, że limit wykrywania 6-metylkumaryny wynosi 0,004 mg/l.Spełnia wymagania eksperymentalne.
2.5 Wynik badania próbki kosmetyki
Rys. 5 Chromatogram badawczy próbki kosmetyki
Uwaga: 6-metylokumaryna nie została wykryta w próbce kosmetyki.
2Uwaga:
Przy użyciu szybkiej wirówki należy zadbać o to, aby rury były umieszczone symetrycznie i aby całkowita masa rury po przeciwnych stronach była taka sama.
3Wniosek
Metoda analityczna wprowadzona w niniejszym artykule, z uwzględnieniem "Normatyk bezpieczeństwa i technicznych dla kosmetyków" w zakresie wykrywania 6-metylkumaryny,za pomocą wysokowydajnej chromatografii ciekłej Wayeal serii LC3200 z detektorem UVWyniki eksperymentu pokazują, że forma szczytu 6-metylkumaryny jest dobra w badaniu adaptacyjności systemu i nie ma innych szczytów wokół docelowego szczytu,a teoretyczna liczba tablic jest wysokaWartość współczynnika korelacji krzywej R jest powyżej 0.9999RSD powtarzalności czasu retencji 6-metylkumaryny wynosi 0,061%, a RSD powtarzalności obszaru szczytowego wynosi 0,222%, co wskazuje na dobrą powtarzalność..Wszystkie powyższe wyniki badań spełniają wymagania przyrządu w metodzie standardowej.
Wyślij do nas zapytanie