Określenie glikolu polietylenowego chromatografią permeacyjną żelową
1Wprowadzenie
Celem: określenie masy cząsteczkowej i rozkładu poliglikolu etylenowego (PEG) metodą chromatografii permeacyjnej żelowej o wysokiej wydajności (GPC).
Metoda:
Xtimate SEC-120, kolumna chromatograficzna permeacji żelowej o długości 5 μm, 7,8x300 mm
Detektor różnicowego wskaźnika załamania (RID)
Faza ruchoma: woda ultraczysta
Przepływ: 1,0 ml/min
Temperatura kolumny: 35 °C;
Objętość wstrzyknięcia: 10 μl.
Określenia kalibracyjne są ustalane, a wyniki masy molekularnej i rozkładu każdej próbki są obliczane za pomocą oprogramowania GPC.
Wynik: linearność PEG jest dobra, gdy masa molekularna wynosiła 400-20000; możliwość odtworzenia eksperymentu jest dobra, przy 6 kolejnych wstrzyknięciach PEG6000,wartość RSD czasu retencji wynosi 00,105%, a wartość RSD powierzchni szczytowej wynosi 0,335%.
Wniosek: chromatografia permeacyjna żelowa o wysokiej wydajności (GPC) jest wiarygodną metodą określania masy cząsteczkowej i rozkładu PEG,który ma zalety dokładności i wysokiej odtwarzalności, gdy jest stosowany do oceny właściwości polidispersity związków polimerowych.
Słowa kluczowe: HPLC, GPC, RID, Polimer, Glikol polietylenowy
2Metoda eksperymentalna
2.1 Konfiguracja przyrządów
Tabela 1 Wykaz konfiguracji wysokowydajnych chromatografów ciekłych
| - Nie, nie. |
Modułowe |
Kty |
| 1 |
Wysokiej wydajności ciekła chromatografia serii LC3200 |
1 |
| 2 |
PB3200 Pompy binarne |
1 |
| 3 |
RID3300 |
1 |
| 4 |
CT3200 Piekarnik kolumnistyczny |
1 |
| 5 |
AS3200 Autosampler |
1 |
2.2 Warunki badania
Kolumna chromatograficzna: Xtimate SEC-120,5μm,7,8x300mm
Temperatura kolumny: 35°C
Detektor: RID
Przepływ: 1,0 ml/min
Faza ruchoma: woda
Pojemność wstrzyknięcia: 10 μl
2.3 Instrument/czynnik i materiały eksploatacyjne
Odczynniki:
Ultraczysta woda
Standard: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Sprzęt pomocniczy
Waga analityczna
Jednostka do ekstrakcji rozpuszczalników
Ultradźwiękowy czyściciel
Materiały eksperymentalne
Membrana filtrująca: membrana filtrująca wodną 0,45 μm
2.4 Przygotowanie normy PEG
Pipety 0,20 g każda z norm PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 i PEG20000, dodaje się 10 ml wody do rozpuszczenia, dobrze miesza się i przygotowuje się stężenie próbki 20 mg/mL do badania.
3Wynik i dyskusja
3.1 Różne normy masy molekularnej
Rys. 1 Chromatogram PEG400
Tabela 1 Parametry chromatograficzne PEG400
| - Nie, nie. |
Związki |
Czas przechowywania |
Obszar szczytu |
Numer tablicy termicznej |
Wskaźnik pozostałości |
| 1 |
PEG400 |
10.315 |
501.732 |
2346 |
1.185 |
Rys. 2 Chromatogram PEG2000
Tabela 2 Parametry chromatograficzne PEG2000
| - Nie, nie. |
Związki |
Czas przechowywania |
Obszar szczytu |
Teoretyczny numer tablicy |
Wskaźnik pozostałości |
| 1 |
PEG2000 |
8.659 |
499.892 |
1926 |
1.230 |
Rys. 3 Chromatogram PEG6000
Tabela 3 Parametry chromatograficzne PEG6000
| - Nie, nie. |
Związki |
Czas przechowywania |
Obszar szczytu |
Teoretyczny numer tablicy |
Wskaźnik pozostałości |
| 1 |
PEG6000 |
7.215 |
499.482 |
|
1.171 |
Rys. 4 Chromatogram PEG10000
Tabela 4 Parametry chromatograficzne PEG10000
| - Nie, nie. |
Związki |
Czas przechowywania |
Obszar szczytu |
Teoretyczny numer tablicy |
Wskaźnik pozostałości |
| 1 |
PEG10000 |
6.612 |
483.657 |
2550 |
1.265 |
Rys. 5 Chromatogram PEG20000
Tabela 5 Parametry chromatograficzne PEG20000
| - Nie, nie. |
Związki |
Czas przechowywania |
Obszar szczytu |
Teoretyczny numer tablicy |
Wskaźnik pozostałości |
| 1 |
PEG20000 |
6.081 |
497.803 |
1103 |
1.799 |
Rys. 6 Nakładanie się chromatogramów o różnej masie molekularnej
Uwaga: Powyższe dane pokazują, że czas retencji PEG20000 wynosi 6,081 minuty, a PEG400 10,315 minut, najpierw wyluuje się większe cząsteczki, a później mniejsze.
3.2 Powtarzalność
Rys. 7 Chromatogramy nakładania się powtarzalności PEG6000 (n=6)
Tabela 7 Parametry chromatograficzne powtarzalności PEG6000 (n=6)
| - Nie, nie. |
Próbki |
Czas przechowywania |
Obszar szczytu |
| 1 |
6000 |
7.233 |
498.821 |
| 2 |
6000 |
7.234 |
503.367 |
| 3 |
6000 |
7.225 |
499.891 |
| 4 |
6000 |
7.221 |
499.560 |
| 5 |
6000 |
7.219 |
501.374 |
| 6 |
6000 |
7.215 |
499.482 |
| Średnia |
- |
7.225 |
500.416 |
| RSD ((%) |
- |
0.105 |
0.335 |
Uwaga: powtarzalność jest dobra. RSD czasu retencji wynosi 0, 105% i RSD obszaru szczytowego wynosi 0, 335% dla 6 zastrzyków PEG6000.
3.3 Standardowe krzywe
Rys. 8 Standardowe krzywe chromatogramy o różnej masie molekularnej
Tabela 8 Standardowe krzywe parametry chromatograficzne różnych mas molekularnych
Uwaga: Wyniki masy molekularnej i rozkładu każdej próbki są obliczane za pomocą oprogramowania GPC.000, a współczynnik korelacji liniowej wynosi 0.999.
4Wniosek
Badanie tego glikolu polietylenowego (PEG) wykonuje się chromatografią żelową przy użyciu chromatografu ciekłego o wysokiej wydajności serii LC3200 z detektorem różnicowego wskaźnika załamania.czas retencji PEG20000 wynosi 6W przypadku, gdy wzorzec PEG400 wynosi 10,315 minut, większe cząsteczki są wyluowane najpierw, a mniejsze cząsteczki później.105% i RSD powierzchni szczytowej wynosi 0Liniowość masy cząsteczkowej PEG jest dobra w zakresie od 400 do 20,000, a współczynnik korelacji liniowej wynosi 0.9999. Wysokiej wydajności żelowa chromatografia permeacyjna (GPC) jest wiarygodną metodą określania masy cząsteczkowej i rozkładu PEG,który ma zalety dokładnych i odtwarzalnych wyników, gdy jest stosowany do oceny właściwości polidispersity związków polimerowych.
Uwaga: Próbkę należy pozostawić w temperaturze pokojowej przez ponad 12 godzin i należy delikatnie ją zmieszać, nie stosować ultradźwięków ani mocno wstrząsać w celu przyspieszenia rozpuszczenia.
Twoja wiadomość musi mieć od 20 do 3000 znaków!
