Określenie lbuprofenu w kapsułkach o przedłużonym uwalnianiu metodą wysokowydajnej chromatografii ciekłej
Metody analityczne przedstawione w niniejszym dokumencie,w sprawie określenia zawartości ibuprofenu w kapsułkach o przedłużonym uwalnianiu w Farmakopei Chińskiej Republiki Ludowej w wydaniu z 2020 r., przeprowadzono na wysokowydajnym chromatografie ciekłym serii Wayeal LC3200 z detektorem DAD.
1Konfiguracja przyrządu i metoda eksperymentu
1.1 Konfiguracja przyrządów
Tabela 1 Wykaz konfiguracji Wayeal HPLC
| - Nie, nie. | Modułowe | Kty |
| 1 | P3210Q Pompa kwaternowa | 1 |
| 2 | CT3210 Piekarnik kolumnistyczny | 1 |
| 3 | AS3210 Autosampler | 1 |
| 4 | DAD3260 DAD | 1 |
| 5 | Nova Atom PC18 4,6*250 mm, 5 μm | 1 |
| 6 | Stacja robocza SmartLab | 1 |
1.2 Metoda eksperymentalna
1.2.1 Przygotowanie odczynników
| - Nie, nie. | Odczynniki | Czystość |
| 1 | Metanol | Chromatografia czysta |
| 2 | Acetonitrylu | Chromatografia czysta |
| 3 | Octan sodu | AR |
| 4 | Kwas octowy lodowy | GR |
1.2.1.1 Roztwór badawczy: wziąć zawartość poniżej różnicy obciążenia, dobrze wymieszać, wziąć odpowiednią ilość (ekwiwalent około 0,1 g ibuprofenu) do kolby pomiarowej o pojemności 200 ml, dodać metanolu o pojemności 100 ml,drżenie przez 30 minut, rozcieńczyć i ustawić objętość wodą, odłowić, filtrować i usunąć filtrat.
1.2.1.2 Roztwór referencyjny: Weź 25 mg próbki referencyjnej ibuprofenu, dokładnie ją waż, wkładaj do kolby pomiarowej o pojemności 50 ml, dodaj 25 ml metanolu, aby rozpuścić, rozcieńcz i ustaw objętość wodą,dobrze wstrząsnąć.
1.2.1.3 roztwór buforowy octanu sodu: waż 6,13 g octanu sodu, dodaj 750 ml wody do rozpuszczenia i dopasowuj pH do 2,5, za pomocą kwasu octowego lodowego.
1.2.2 Warunki chromatografii
Tabela 3 Warunki chromatografii
| Chromatografia Colimn | Nova Atom PC18, 4,6*250mm5μm | ||
| Faza mobilna | roztwór buforowy octanu amonu | ||
| Wskaźnik przepływu | 1 ml/min | ||
| Temperatura | 35°C | Długość fali | 263nm |
| Pojemność wstrzyknięcia | 20 μl | ||
Rys. 1 Chromatogram badań próbek
Tabela 4 Dane badania próbki testowej
| Próbka | Związek | Czas przechowywania | Obszar szczytu | Wysokość szczytu | Teoretyczna liczba Pate |
| Próbka badawcza | ibuprofen | 4.778 | 1204.748 | 223.865 | 18650 |
Rysunek 2 Chromatogram próbki referencyjnej
Tabela 5 Próbka referencyjna danych badawczych
| Próbka | Związek | Czas przechowywania | Obszar szczytu | Wysokość szczytu | Teoretyczna liczba Pate |
| Próbka referencyjna | ibuprofen | 4.781 | 1515.707 | 280.794 | 18541 |
Z chromatogramu i tabeli widać, że szczyty próbki testowej i próbki referencyjnej są dobre, nie ma innych szczytów wokół szczytów docelowych,Teoretyczne numery tablic są powyżej 2500 w farmakopei., który spełniał wymagania eksperymentalne.
3.2 Powtarzalność
Rys. 3 6 Chromatogram powtarzalności wstrzyknięć próbki testowej
Tabela 6 Dane dotyczące powtarzalności próbki testowej
| Próbka | - Nie, nie. | Czas przechowywania | Obszar szczytu |
|
Próbka badawcza |
1 | 4.778 | 1204.748 |
| 2 | 4.775 | 1205.853 | |
| 3 | 4.778 | 1206.482 | |
| 4 | 4.778 | 1206.091 | |
| 5 | 4.781 | 1208.216 | |
| 6 | 4.781 | 1209.01 | |
| RSD ((%) | 0.053 | 0.131 |
Rys. 4 6 Wstrzyknięcia Chromatogram powtarzalności próbki referencyjnej
Tabela 7 6 Dane dotyczące powtarzalności wstrzyknięć dla próbki referencyjnej
| Próbka | - Nie, nie. | Czas przechowywania | Obszar szczytu |
|
Próbka referencyjna |
1 | 4.781 | 1515.707 |
| 2 | 4.781 | 1515.333 | |
| 3 | 4.781 | 1518.024 | |
| 4 | 4.781 | 1517.524 | |
| 5 | 4.778 | 1515.806 | |
| 6 | 4.778 | 1517.076 | |
| RSD (%) | 0.036 | 0.073 |
Uwaga: Zgodnie z danymi zawartymi w powyższej tabeli RSD czasu retencji dla próbki testowej i próbki referencyjnej wynosi odpowiednio 0,053% i 0,036%, a RSD obszaru szczytowego wynosi odpowiednio 0,131% i 0,073%.Wyniki powtarzalności są dobre i spełniają wymagania eksperymentalne.
3.3 Badanie wrażliwości
Rysunek 5 Chromatogram próbki testowej rozcieńczonej 2000 razy
Tabela 8 Dane z badań dla próbki testowej rozcieńczonej 2000 razy
| Próbka | Związek | Czas przechowywania | Obszar szczytu | Obszar szczytu | Wskaźnik sygnału do hałasu |
| Próbka testowa rozcieńczona 2000 razy | ibuprofen | 4.795 | 0.597 | 0.133 | 4.600 |
Uwaga: Zgodnie z danymi przedstawionymi w powyższej tabeli, szczytowy obszar próbki testowej rozcieńczonej 200 razy wynosi 0,597 przy stosunku sygnał-hałas 4.6, co stanowi dobry wynik badania i spełnia wymagania eksperymentalne.
4. Notatki
Kwas octowy lodowy ma silny, drażniący zapach, dlatego należy uważać, aby przygotować roztwór w komorze.
5Wniosek
Metody analityczne przedstawione w niniejszym dokumencie,w sprawie określenia zawartości ibuprofenu w kapsułkach o przedłużonym uwalnianiu w Farmakopei Chińskiej Republiki Ludowej w wydaniu z 2020 r., przeprowadzono na wysokowydajnym chromatografie ciekłym serii Wayeal LC3200 z detektorem DAD.i nie ma innych szczytów wokół szczytu celuRSD czasu retencji wynosi 0, 053% i 0, 036%, a RSD obszaru szczytowego wynosi 0, 131% i 0, 0.073% dla próbki testowej i próbki referencyjnej ibuprofenuWyniki badania wrażliwości wynoszące 2000 razy rozcieńczenie materiału testowego są dobre. Wszystkie powyższe wyniki spełniają wymagania metody farmakopei.
